四維彩超的最佳檢查時間一般是在懷孕的第20到24周之間，也即在懷孕的第五個月到第六個月期間，這是進行四維彩超檢查的最佳時間。
因為處於這一時期的胎兒的各組織器官的解剖結構已經趨於完善，子宮腔內的空間以及羊水量、胎盤的厚度也適合做四維彩超檢查。而且這一時期的胎兒的骨骼組織對四維彩超的探查影響較小，故而能夠比其他孕期更全面的瞭解胎兒的情況。此外在這一時期很多胎兒的畸形和異常大部分也都能夠表現出來。因此選擇在這一時期進行四維彩超檢查，四維彩超的高解析度能夠清晰地顯示胎兒的各組織器官的解剖結構以及是否存在畸形。另外，對於在之前的常規彩超檢查中懷疑胎兒存在畸形的受檢者，或者胎兒具有罹患畸形的高危因素的受檢者，進行四維彩超檢查是非常有必要的。而且不僅要做四維彩超的檢查，同時還需要到有產前診斷資質的醫院進行產前診斷。
此外，在孕20到24周之間做四維彩超檢查，不僅胎兒的各方面正合適，同時，孕婦也是處於比較合適和安全的時期。而且如果四維彩超檢查出胎兒存在某些異常情況或者存在某些畸形，也都在政策之內，不會太過麻煩。
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