科室: 泌尿外科 副主任醫師 高坪

       精液分析是評估男子生育力的重要方法,也是男科疾病診斷、療效觀察的實驗依據,但精液分析的各引數也不是特異的,它並不能夠確定達到受精位置的少數精子的受精能力,因此要正確評估男子生育能力還需要結合臨床和其它精子功能檢測指標進行綜合評估。
  精液的分析結果易受射精頻度,溫度,實驗室條件,檢驗人員的技術熟練程度,主觀判斷能力等諸多因素影響,其結果易發生偏差,因此精液採集與分析必須嚴格按照適宜的標準化程式進行,才能提供受檢者臨床狀況的必要資訊。
  不育夫婦初診時,男方至少要按標準程式做兩次精液分析,兩次分析如有明顯差異,還要進行第三次分析。
  精液標本可能含有致病菌和病毒(如HIV病毒,肝炎病毒,單純皰疹病毒等),因此應視為生物危險品。實驗室技術人員應注意防護,要使用一次性手套和各種器皿。
  用過的器皿要消毒處理。精液培養,用於生物測定,宮腔內受精或體外受精,在處理過程中必須嚴格用無菌材料和無菌操作。
  一、精液標本的採集和運送
  精液採集規範化是做好精液分析的前提條件,因此在精液採集前務必要詳細告知受檢者有關精液採集和運送的方法及注意事項。
  1、標本採集前應禁慾至少48小時,但不超過7天。為減少精液分析結果的波動,禁慾的天數應儘可能恆定。每一份精液分析報告都應寫明:病人姓名、禁慾時間、標本採集的日期和時間、標本採集是否完整以及標本從採集到分析的時間間隔等。

  2、初檢者應做兩次精液分析,兩次精液採集的間隔應大於7天,但不能超過3周。如果兩次的結果有明顯的差異,應再取標本進行第三次分析。
  3、標本的採集最好在實驗室附近的取精室內單獨進行。否則,應在採集後1小時內送到實驗室。
  4、最好用手淫的方法取精液,收集精液要用對精子無毒性作用的廣口玻璃或塑料容器中。溫度應保持在20~40℃,以避免降低精子活力。如果要做微生物學方面的檢查,病人應先排尿並洗淨雙手和陰莖,用無菌容器收集。
  5、如手淫取精有困難,可用特製的避孕套進行精液採集。因日常用的乳膠避孕套會影響精子的存活,故不能用於採集精液。性交中斷法也不宜用於採集精液,因為射精最初部分可能丟失,而這部分精子密度通常是最高的。而且,標本會受到女性生殖道內細菌和微生物的汙染;同時酸性的陰道分泌物對精子活力也會產生不利的影響。
  6、精液採集一定要完整,不完整的精液不宜進行分析。
  7、標本在運送到實驗室的過程中,溫度應保持在20℃以上,但不能超過40℃。
  8、收集精液的容器必須標明受檢者姓名(和/或身份證號碼)以及標本採集的日期和時間。
  二、精液的肉眼觀察
  1、精液的液化

  室溫下,精液射出體外立即會凝固,隨後進入液化過程,此過程多在15分鐘內完成,如超過60分鐘精液不液化應視為異常。因此,建議取精後20分鐘、30分鐘、60分鐘觀察液化情況並記錄液化所需時間,及是否完全液化。正常精液可以含有不液化的膠凍狀顆粒,這一現象沒有臨床意義。

  精液液化時間延長,不完全液化或不液化,通常與前列腺分泌功能低下,蛋白溶解酶缺乏有關。
  精液不液化,需另行處理,可用機械混勻或菠蘿蛋白酶消化(菠蘿蛋白酶1g/L)。
  加入等量的培養液並重複用加樣器吹打也可以使某些標本液化。應注意的是,所有這些處理方法都可能影響精漿的生化、精子活力和精子形態學的測定結果。
  2、精液的外觀
  精液標本液化後首先應在室溫下肉眼觀察其外觀。正常的精液質地均勻、呈灰白色,禁慾時間長精液可略帶黃色。如果精子密度非常低或無精子,精液可顯得稀薄。如有紅細胞,精液可呈紅褐色。如有黃疸或服用某些維生素,精液可呈黃色。
  3、精液量
  精液量可用錐形底的刻度量筒測量。正常男子每次射精,精液量不少於2ml。精液量少常與取精時部分精液丟失有關。如精液無丟失,量少且不凝固,無精子,體檢時輸精管缺如,應考慮精囊腺先天發育不全。
  4、精液粘稠度
  評估粘稠度的方法可用一寬孔的5ml吸管輕輕吸入精液,正常精液由於重力作用在管口形成不連續的小滴,粘稠度異常時液滴會形成>2cm的拉絲。
  檢測粘稠度的另一個方法,是將一玻璃棒插入精液,提起玻璃棒,並觀察拉絲長度,拉絲長度超過2cm視為異常。高粘稠度精液可阻礙精子的運動。
  5、PH值
  PH值應在射精後1小時內測定。將一滴精液滴在PH試紙上(PH試紙範圍為6.1~10.0或6.4~8.0),30秒後,浸溼區域的顏色應該均勻一致,與標準帶比較讀出其PH值。無論使用哪種PH試紙,都應該用已知標準核查其準確性。
  三、精液的顯微鏡檢查
  精液顯微鏡檢包括精子密度、精子活力、精子存活率、精子凝集、非精子細胞成分的測定和精子的形態學分析。
  建議精液鏡檢使用相差顯微鏡。普通光學顯微鏡亦可,但要調好聚光器。
  1、鏡檢標本的製備
  精液取樣的體積和蓋玻片的尺寸應標準化,以使精液在大約20μm的厚度下進行分析。在精確檢測精子密度之前,應粗略測定精子密度。具體方法是:
  用加樣器將10μl的精液滴在乾淨載玻片上,再蓋上22L×22L的蓋玻片。蓋玻片的重量使標本展開以達到最佳觀察效果,注意避免在蓋玻片和載玻片之間產生氣泡。
  放置1分鐘使其穩定。檢測可在20~24℃室溫下進行,由於溫度會影響精子的活力分級,因此實驗室的溫度必須標準化。精子活力和運動速度與溫度高度相關,建議進行活力的評估時,最好使用保溫鏡臺,檯面溫度恆定在37℃。
  製備好的標本應先在100倍鏡下觀察是否有粘液絲形成、精子凝集以及標本在載玻片上展開的是否均勻,然後在400倍鏡下進行檢查。
  2、精子密度的初檢
  在精確計數精子密度前要進行精子密度的初檢,初檢結果將作為精液稀釋倍數的依據。不同顯微鏡放大400倍視野的直徑是不同的,一般直徑範圍為250~400μm,相當於1~2.5nl,厚度為20μm的樣本。
  視野的直徑可由微標尺或記數池中的格子確定。計數每個視野的精子個數,乘以106/ml就是粗略估算的精液標本的精子密度。此估算結果用來決定用血細胞記數板測精子密度的稀釋倍數:200個精子,1:50稀釋。
  如果每個視野的精子數目差異較大,提示標本是不均勻的。在這種情況下,精液標本應再次混勻,重新取樣、檢測。精液粘稠度異常、液化不全、精子在粘液絲中聚集或精子凝集都會影響精液混勻。
  如果精子數目少(400倍鏡下每視野少於1~2個),可以用離心方法濃縮標本後再測定精子密度。取1ml精液(或儘可能多的精液)600g離心15分鐘。棄去已知體積的精漿,充分混勻沉澱後計數。
  最終密度根據棄去的精漿體積進行校正。標本離心後也可以進行精子活力和形態學方面的評估。如果離心濃縮後精子數目還少(每視野少於1~2個),報告精子密度為3000g離心15分鐘。只有當所有沉渣重新懸浮,經徹底和系統檢查後發現無精子,這時才能作出無精子的判斷。
  3、精子活力的評估
  精子活力是指精子前向運動的能力,為便於操作將精子活力分為a、b、c、d四級。
  “a”級:快速前向運動(即37℃時速度≥25μm/s,或20℃速度≥20μm/s)。
  “b”級:慢速或呆滯的前向運動。
  “c”級:非前向運動。

注:此資訊源于網路收集,如有健康問題請及時咨詢專業醫生。


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