24小時尿蛋白定量主要是通過收集病人24小時的全部尿液，主要通過化驗方法測定其中的蛋白質含量，以診斷泌尿系統的疾病。
這種檢驗方法又稱為24小時尿蛋白排洩率測定，從當天早晨排掉第一次小便開始計時，到次日同一時間，把所有排出的尿液收集在一個大的容器之內，攪拌均勻之後，取其中20毫升的尿液，通過雙縮脲法或是尿蛋白沉澱發測定標本的尿蛋白濃度，除以20，再乘以全天總的尿液體積，就是24小時總的尿蛋白量。
正常人尿液中一般會有小於150mg的尿蛋白，如果超過正常劑量，應當結合臨床症狀分析其內在原因。一般在劇烈運動、發熱、精神緊張也會導致尿蛋白暫時性尿蛋白升高，經過休息一般就可以緩解。很多疾病，腎小球疾病、腎小管疾病、多發性骨髓瘤、泌尿道炎症、結石、腫瘤等疾病會導致腎臟濾過膜的濾過孔徑、電荷屏障等損傷，導致原尿中的蛋白質濾出，24小時尿蛋白定量明顯升高。
24小時尿蛋白測定是診斷腎臟疾病的一種定量診斷方法。如果發現顯著增高，通常為嚴重的腎臟疾病。
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