胰島素可注射在上臂、大腿前面和側面、臀部、和腹部(肚臍周圍2英寸範圍除外)的皮下組織。常規注射不建議肌肉內注射。輪換注射部位對於防止脂肪增生或脂肪萎縮是很重要的。推薦在一個區域內輪換(例如，在腹部對稱地輪換注射)，而不是每次注射輪轉到不同區域。這種方法可降低每日間的吸收差異。
在選擇注射部位時應考慮到不同部位間吸收的差異。腹部的吸收最快，隨後是上臂，大腿，和臀部。運動增加註射部位的吸收，原因很可能是因為增加了面板的血流，還可能是由於區域性作用。脂肪增生的區域常顯示較低的吸收率。吸收的速度在皮下和肌肉內也不同。後者吸收更快。雖然肌肉內注射不推薦作為常規方法，但在有些情況下可以使用(例如，糖尿病酮症酸中毒或脫水)。
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