1、眉間皺紋
A型肉毒毒素在美容領域最早應用於眉間，這也是應用最多的部位。標準5點注射法適用於大多數患者，每側2點注射皺眉肌，中間1點注射降眉間肌，每點注射4～5U。中間的降眉間肌點和內側的皺眉肌點注射位置較深，直接注射到肌肉中。外側的皺眉肌及眼輪匝肌纖維點注射要淺，皮下注射即可。所有注射點應位於眶緣以上至少1cm，以防止藥物播散至上瞼提肌造成上瞼下垂。測量時應以眶緣為參照點而不是參照眉，對於眉下垂的患者，如果以眉的位置進行參照會對醫生產生誤導，造成注射部位低於眶緣。對於額肌參與提上瞼和提眉功能的患者，皺眉肌外側點注射過高也可能造成上瞼下垂或眉下垂。
2、額部皺紋
A型肉毒毒素治療額紋的效果良好。嚴重的額紋不能僅依靠A型肉毒毒素，還需要結合軟組織填充材料注射或手術。
額部肉毒毒素治療的目標是改善額紋，但不引起眉下垂，不影響上面部表情表達。建議應用保守的劑量，以防止出現表情僵硬。當患者努力上提眉時可以評估額肌的力量。靜息狀態及最大提眉狀態下雙側眉位置的微小差別都要標記。標記眉的對稱性非常重要，需要治療前照相併與患者進行交流。
在女性患者常採用V形注射方式，但在男性不宜選擇這種方式。這種注射方法可能導致眉弓過高，如果在眉尾上方的額部追加註射小劑量肉毒毒素可以避免眉弓過高。如果發生眉弓過高，可以在眉弓的頂點上方1～2cm進行小劑量肉毒毒素注射。
通常在治療額紋的同時治療眉間皺紋，這樣整體效果更佳，而且同時麻痺了降眉肌群，可以降低眉下垂的風險。
3、魚尾紋
眼輪匝肌的反覆收縮造成外眥外側呈放射狀的魚尾紋，區域性注射肉毒毒素對治療魚尾紋有明顯的效果。魚尾紋治療常用3點注射，每點注射3～5U，在眶外緣呈扇形注射。中間注射點與外眥處於同一水平，注射點間距8～10mm，但具體需結合皺紋分佈情況。
在瞳孔中線瞼板下方2mm處下眼瞼追加註射1U肉毒毒素，會使肌肉平滑，使眼睛顯得更大。但過度治療可能導致眼瞼外翻。
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