由於血清泌乳素（PRL）水平受許多因素影響，故應清晨空腹進行採血測定。若泌乳素水平在正常上限3倍以下，應至少檢測兩次以確定有無高泌乳素血癥。
高泌乳素血癥根據病因可分為以下三類：
（一）生理性因素
妊娠、哺乳、運動、熟睡、性交、壓力狀態等均可致高泌乳素血癥。手術等壓力狀態下PRL升高與壓力程度相關，一旦壓力解除，PRL將恢復正常。
（二）病理性因素
慢性腎功能不全患者，腎小球對PRL濾過率降低，可導致血清PRL中度升高，約三分之一腎臟病患者存在高泌乳素血癥。甲狀腺功能減退症患者中約有20％存在PRL水平輕度升高，可能由於長期甲減或甲減治療不充分，造成垂體增生，導致類似垂體瘤的病理生理改變。此時補充甲狀腺激素可降低PRL水平並使增生的垂體縮小。
較大的非功能性垂體瘤、下丘腦肉芽腫性病變、顱咽管瘤、蝶鞍上手術等因素使垂體柄受壓或多巴胺神經元受損，造成到達泌乳素細胞的多巴胺水平下降，可導致高泌乳素血癥的發生，此時PRL水平一般在20μg/L~100μg/L之間。
且使用多巴胺受體激動劑可使PRL水平降低。特發性高泌乳素血癥病因不明，可能由於下丘腦調節機能改變所致。在排除生理性、藥物性及其他病理性因素後，方可確立診斷。其中有不到10％的患者可能存在較小的泌乳素微腺瘤但未被影像學檢查發現。約30％特發性高泌乳素血癥患者可自行緩解；10％~15％PRL水平進一步升高；其餘PRL水平保持穩定。
由於泌乳素細胞與生長激素細胞存在一定同源性，有約50％肢端肥大症患者存在高泌乳素血癥；另外，由於人體GH與PRL一樣有催乳作用，故生長激素瘤患者症狀體徵可與泌乳素瘤者類似，應注意排查。多囊卵巢綜合徵患者中約有30％存在高泌乳素血癥。其他垂體病變，如淋巴細胞性垂體炎、TSH瘤等，亦可導致高泌乳素血癥。
（三）藥物因素
許多藥物可促進PRL分泌，例如抗精神病藥物可通過降低多巴胺水平或拮抗其作用導致PRL水平升高。其他如某些麻醉藥、抗抑鬱藥、抗組胺藥物等亦可導致高泌乳素血癥。大多數由藥物引起的高泌乳素血癥患者PRL<150μg/L。
值得注意的是，由於泌乳素瘤可能與其他引起高泌乳素血癥的因素同時存在，故即使PRL水平只是輕度升高，也應進行垂體影像學檢查。
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