膽管癌是一種比較少見的消化道惡性腫瘤,但近年其發病率呈逐漸上升趨勢。外科根治性切除術為目前膽管癌治療的主要手段,但療效並不滿意。因此,深入認識管癌的發生、發展的機制,尋求新的治療手段,來提高膽管癌療效成為目前膽管癌研究的熱點之一。
核因子κB(nuclear factor kappa B ,NF2κB) 是一種多效的調控多基因表達的重要轉錄因子,能調節多種基因的轉錄,其表達與許多細胞因子、黏附分表達有關,同時與血管形成也存在一定的關係。越來越多的研究顯示NF2κB 在多種腫瘤裡呈現高表達,包括肺非小細胞癌、淋巴瘤、乳腺癌、結腸癌等,但國內外的文獻中對NF2κB 在膽管癌中的報道較為少見。
cyclinD1 是一種被公認的原癌基因,其過度表達已證實與多種腫瘤細胞的旺盛分裂有關。VEGF 是一個最具普遍意義的腫瘤血管形成刺激因子,與腫瘤新生血管密切相關。本研究通過免疫組織化學的方法,測定膽管癌患者的腫瘤組織中NF2κB 、cyclinD1 、VEGF 的表達,結合臨床病理學特徵進行分析,探討NF2κB 在膽管癌中的作用。
病例資料
所有病例選自山西醫科大學第一臨床醫學院2000 -2007 年期間手術治療的膽管癌病例56 例, 其中男31 例, 女25 例, 男女比例 25∶1; 年齡32-74 歲,平均為(55. 12 ±4. 36) 歲。其中肝門部膽管癌32 例,中段膽管癌7 例,下段膽管癌17 例。病理分型為:高分化腺癌為18 例,中分化腺癌為26 例,低分化腺癌為12 例,伴有淋巴結轉移25 例,神經浸潤18 例。
對照為2002 -2007 年手術切除良性病變肝外膽管37 例(包括10 例先天性膽總管囊腫,27 例肝外膽管結石),其中男17 例,女20 例,男女比例為1∶1. 18 ; 年齡26 -68 歲,平均為(49. 25 ±3. 64) 歲。
試劑
NF2κBp65 單克隆抗體為Santa Cruz ・248 ・ 山西醫科大學學報(J Shanxi Med Univ) 2008 年3 月, 39 (3) Biotechnology 產品,VEGF 單克隆抗體和cyclinD1 單克隆抗體為北京中山生物技術有限公司產品,上述抗體均購自北京中山生物技術有限公司。
檢測方法
採用免疫組化Power Vision 兩步法進行染色(按試劑盒說明書進行),用PBS 取代一抗作為空白對照,用已知陽性組織片作為陽性對照。
結果判定
NF2κBp65 ,VEGF 陽性表達為細胞質中出現棕黃色顆粒狀物質,cyclinD1 陽性表達為細胞核染成棕黃色,評價採用Frank 等提出的半定量計分法。高倍鏡下(10 ×40) 取五個不同視野, 每個視野計數100 個細胞,將陽性細胞的百分率和染色強度分別計分。
統計學分析
所有資料均採用SPSS13. 0 進2 36 94. 74 Spearman 等級相關。25 1 24 96.00 4.329 0. 05) ,見表2 。NF2κBp65 的陽性表達率與組織分化程度有關,隨著分化程度的降低而表達增高,差異有統計學意義( P < 0. 05) 。
27 2385 5 行統計析。其中免疫組化陽性率的比較,以及病下段組織學 高分化中低分化38 淋巴轉移有17 14 82.35 理學引數間的比較等採用卡方檢驗,相關分析採用18 10 61.1110.252 0.05 女25 4 21 84.00 年齡> 55 歲44 8 36 81.82 0.000 >0.05 < 55 歲12 2 10 71. 43 83. 33 腫塊部位 上段3284.38 0.657 >0.05 7中段神經浸潤有18 0 18 100.00 4.112。
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