維生素B1的用途以往主要用於防治維生素B1缺乏症，目前臨床常用於治療失眠和疲勞症，因為維生素B1可調節植物神經功能，降低大腦皮層的興奮性，有促進睡眠和抗疲勞作用。此外，人們還用維生素B1防治鉛中毒，每日3次，每次30毫克，有明顯的排鉛效果。專家認為，維生素B1的排鉛作用是通過維生素B1或其代謝產物與鉛形成絡合物而促進鉛的排出。
和所有藥物一樣，使用維生素B1也有注意事項。以下“七不宜”是人們在口服維生素B1時必須注意的。
不宜飯前服飯後服用維生素B1有利於其吸收。因為維生素B1是水溶性的，空腹服用後會被快速吸收入血，在人體利用之前經腎臟等排出體外，使藥物不能充分發揮作用。
不宜與氨茶鹼(鹼性藥物)合用維生素B1在鹼性環境中不穩定，並會很快分解，使之遭受破壞，藥力降低或失效。
不宜與阿司匹林合用阿司匹林在胃中水解為水楊酸。維生素B1可使胃液pH值降低，使阿司匹林對胃黏膜的刺激加劇。故兩者不可同時服用。
不宜與藥用炭合用維生素B1可被藥用炭吸附而降低藥效。若必須合併應用，可先口服維生素B1，2～3小時後再服藥用炭。
不宜與口服避孕藥並用口服避孕藥可加速維生素B1的代謝，降低維生素B1在血液中的濃度。長期口服避孕藥者應適當補充維生素B1，以防維生素B1缺乏。
不宜與含鞣質的中成藥合用中成藥四季清片、虎杖浸膏片、複方千日紅片、感冒片、七釐散等含鞣質，可與維生素B1結合產生沉澱，使之不易被吸收利用，並可使維生素B1變質而降低藥效。
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