糞便隱血試驗可能陽性。血清和膽汁中癌胚抗原(CEA)和糖鏈抗原CA-199、CA-50、CA-242在膽管癌中有一定陽性率，可用於輔助診斷和術後隨訪。
1、直接膽紅素增高：實驗室檢查呈梗阻性黃疸的表現，血清總膽紅素和直接膽紅素升高表現為膽汁淤積性黃疸。
2、繼發性肝損害：表現在長期膽道梗阻者，可有繼發性肝功能損害，ALT和AST輕度升高是繼發性肝損害的表現。血清總蛋白和白蛋白減少系營養不良和肝損害的表現。凝血酶原時間延長系膽道阻塞和繼發性肝損害的表現。γ-GT及鹼性磷酸酶增高。在早期未出現黃疸時ALP、γ-GT就有升高，提示膽道阻塞。
3、血象檢查：半數以上患者血白細胞計數在8×109/L以上，若明顯升高，提示膽道感染。61%～70%患者可有不同程度的Hb減少。
影像學檢查的主要目的是診斷梗阻的部位、判斷可能的病變性質和估計病變的範圍以及和周圍組織器官的關係。
4、B超：在諸多影像學檢查中，B型超聲為首選診斷方法。實時超聲檢查對膽管梗阻的部位和程度的診斷率高，對膽管擴張的檢出率可達95%以上，為首選檢查。超聲導引下細針穿刺抽吸細胞學檢查是一種簡便、安全、有效的方法。內鏡超聲(EUS)的探頭與膽道系統僅隔一層腸壁，排除了胸腹壁與胃腸道重疊等干擾，可更清晰地觀察膽道情況。管腔內超聲(intraductal-ultrasonography,IDUS)利用微型超聲探頭，可經PTC竇道或ERCP途徑直接進入膽道掃描，完全排除了遮蓋膽道組織的干擾，影象較EUS更為清晰。IDUS能探查到膽管微小癌，膽管癌浸潤深度的判斷準確率為73%，對胰腺和十二指腸是否受累及的判斷準確率達100%。更進一步使用管腔內彩色多普勒超聲技術(ECDUS)，可探查膽道系統周圍的血管血流，對判斷肝動脈和門靜脈是否被侵犯的準確率達100%。
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