1、定性診斷：
（1）符合Whipple 三聯徵（反覆發生空腹低血糖；發作時血糖<2.8mmol/L；進食或補充葡萄糖後症狀迅速緩解）。
（2）同步血清胰島素濃度≥36 pmol/L，血清胰島素水平和血糖比值>0.3；C 反應肽濃度≥200 pmol/L，胰島素原≥5 pmol/L。
（3）必要時可在密切監護下進行延長至72h的飢餓試驗。
（4）建議測定血清鈣、甲狀旁腺素（PTH）、胃泌素、催乳素（PRL）等激素水平，以排除MEN。
2、定位診斷：
（1）上腹部B 超。注意大量飲水後半臥位檢查，有條件時行六氟化硫微泡造影。
（2）上腹部薄層CT或磁共振（MR）平掃加增強，掃描間距3-5 mm。對CT應強調多期動脈薄層掃描，對MR建議採用率選擇預飽和法抑脂技術和動態增強快速干擾梯度回波（FSPGR）序列掃描。在明確胰腺病變時應同時注意有無肝臟轉移性病灶。
（3）有條件時可行內鏡超聲胰腺掃描，必要時在內鏡超聲定位下行腫瘤細針穿刺細胞學檢查。
（4）無創檢查不能明確定位的病例，建議進行選擇性動脈鈣刺激靜脈採血（ASVS）測定胰島素水平。也可經皮經肝穿刺門靜脈插管分段採血（PTPC）測定胰島素水平。
3、治療：定性診斷明確後，若有手術探查指徵，應儘可能明確定位。手術徑路以能充分顯露胰腺為宜，有條件的醫學中心可考慮經腹腔鏡探查切除。腫瘤摘除是主要的手術方式。對胰腺實質內的腫瘤、胰體尾多發腫瘤或惡性胰島素瘤，可行區域性胰腺切除，包括保留或切除脾臟的胰腺體尾部切除。位於胰頭和鉤突部的巨大腫瘤（直徑＞5cm）或胰頭多發腫瘤，可行保留十二指腸的胰頭切除、保留幽門的胰十二指腸切除或經典式胰十二指腸切除術。如胰腺未發現病變，要仔細探查肝、十二指腸韌帶、脾門等處。
對確實未能找到腫瘤的病例，不宜盲目行胰體尾切除，應於術中行門靜脈和脾靜脈分段採血後終止手術，術後對上述標本進行胰島素測定以幫助定位，或術後行ASVS 定位明確腫瘤所在區域後再次手術。如仍不能定位，則予以密切隨訪。
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