檢測支原體的方法有培養法、血清學方法(包括酶聯免疫吸附和微量免疫熒光試驗，但臨床少用)和生物學方法(包括DNA探針和PCR)，前者常與藥物敏感試驗同時進行。支原體培養及體外藥敏試驗在臨床診斷和治療中的意義如下:
1、對臨床疑似支原體感染的患者,應先進行病原的培養鑑定及藥敏試驗,以便作出正確的診斷,選擇敏感的藥物進行合理、有效的治療,既有助於抗生素的合理和安全應用,又有助於治癒率的提高,更有助於控制耐藥菌株的產生和蔓延,還可防止盲目、隨意應用抗生素造成的經濟浪費和機體傷害。
2、當然,完全按照藥敏結果用藥,並不一定保證100％治癒,因為體外的藥物敏感試驗結果與體內藥物活性存在一定差別。治療前做藥敏試驗,可指導治療時儘量選用高敏藥物,並做到合理、足量、規則用藥。
3、培養出支原體，數量≥104，並有臨床症狀，則可確診，應予積極治療。如果沒臨床症狀，支原體數量≤104，一般可不予治療，但未生育的親年則應酌情給予治療。
4、體外藥敏試驗含四環素、大環內脂及氟喹諾酮三大類不作用於細胞壁生物合成的抗生素，如果藥敏結果顯示感染株對報告單上三類抗生素類均不敏感，可用此次藥敏試驗以外的抗生素或者按照“90”，“60”原則，結合患者的用藥史及臨床表現，即選用不敏感的抗生素類藥物，也可能有60％的患者獲得療效。
5、用藥治療要充分，療程一般為10-14天;持續和復發病例則需30天療程。
6、完成治療療程停藥後1周，複查支原體，如培養72小時後無生長，則為陰性，表明疾病已痊癒。如仍有生長且數量≥104，表明治療失敗;在排除再感染後，應視為持續病例，則依其藥敏結果，予以重新治療，且療程應為30天。
為了提高培養陽性率和準確性，應注意以下三點：
(1) 取標本前需停用抗生素類藥物5-7天。
(2) 男性患者最好在排尿後2小時以上才能取標本。
(3) 取材時，棉拭子伸人尿道或宮頸口內約2cm,且要反覆旋轉拭擦，以取得黏膜上皮細胞，而不是取得分泌物或白帶，更不是尿液。
PCR方法的敏感性和特異性均高，由於治療後雖已培養轉陰而死亡的支原體尚未被機體清除時，作PCR檢查結果可能為陽性，所以臨床上不用此法來確診和評價療效。
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