當急性胰腺炎具有典型病史、症狀與體徵時，結合血尿澱粉酶測定(>256溫氏單位或>500蘇氏單位)，及影像(X線、B超及CT)檢查，診斷多無困難。然而，當無典型臨床表現時，則不易診斷，因此，凡遇到急腹症時，即應想到本病的可能，對其臨床徵象及各種實驗室檢查結果作動態觀察，以便補充、完善診斷。必要時腹腔穿刺抽出液進行澱粉酶測定對診斷有較大幫助。有時還應注意，引起本病的原發疾病，以防被掩蓋。因而要仔細分析，防止誤診。
同時在診斷中應與急性膽囊炎、膽石症、潰瘍病穿孔、急性腸梗阻及冠心病等相鑑別，依據諸病各自的特點與本病比較即可加以區別。澱粉酶對胰腺炎的診斷仍不失為良好而簡便可行的手段。由於胰酶在胰管內逆流入血或滲出液重吸收入血，則在急性胰腺炎時血、尿的澱粉酶有所升高。血澱粉酶正常值，溫氏單位<256單位，蘇氏單位<500單位。急性胰腺炎(輕型)發作後6～12小時即升高，48～72小時逐漸恢復正常，尿澱粉酶約在發病後12～24小時升高，要持續3～5天。但急性重型胰腺炎升高的時間要提前。臨床上對澱粉酶值的變化要作全面的分析，再結合臨床其他症狀才能做出正確的判斷。
澱粉酶值正常：病已痊癒可恢復正常，此時全身情況良好，已無腹部體徵。在急性出血壞死型胰腺炎，病情重篤，在初檢時或在治療中，澱粉酶不升高，則可說明病情進行性加重、進一步惡化。因胰腺腺泡大量的壞死、崩潰不已不能分泌澱粉酶――“枯竭”。這一現象在急性出血壞死型胰腺炎中時有發生，應引起高度重視。
澱粉酶升高：有時病人出現腹痛，並出現澱粉酶升高，但臨床的症狀、體徵並非胰腺炎。血清澱粉酶檢測往往是非特異性的，急性胰腺炎根據其病變程度可以有不同程度的升高。而臨床常見的一些急腹症澱粉酶亦可升高，如膽囊炎、膽石症、膽道梗阻、腸梗阻、潰瘍病穿孔、腸繫膜血栓形成以及使用嗎啡後。膽石症時澱粉酶升高，可能因排石時對Oddi括約肌的刺激，使之痙攣則一過性澱粉酶升高，潰瘍穿孔(特別是十二指腸球部穿孔)腸內容物含有大量的胰液，進入腹腔後澱粉酶被腹膜吸收則血澱粉酶值升高。腸梗阻後腸腔內腸液淤積澱粉酶通過受損的腸壁滲入腹腔而被吸收。因此，對澱粉酶的升高必須結合臨床進行判斷，決不可因澱粉酶升高而診斷為胰腺炎。
重型胰腺炎往往伴有腹腔大量炎性腹水，應做腹腔穿刺測定澱粉酶，穿刺抽出的腹水多為血性混濁的液體。澱粉酶含量可以很高。
澱粉酶-肌酐腎廓清率比值(ACCR)：ACCR的正常比值為3.8～5.3％，若比值>5～6％則提示急性胰腺炎。有人發現ACCR在急性胰腺炎以外的疾患亦可升高(如慢性腎衰、糖尿病酸中毒、燒傷、嚴重肝衰)，因此只有在排除以上諸疾患時，才有特異性的意義。
澱粉酶-肌酐腎廓清率比值的計算方法是：
(尿澱粉酶/血清澱粉酶)×(血清肌酐/尿肌酐)×100。
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