眼部有明顯角膜乾燥斑的，結合餵養史，慢性消化系統或消耗性疾病史，診斷並不困難。因維生素A缺乏時常有合併症，故凡營養不良、慢性腹瀉、慢性痢疾、或麻疹後長期忌嘴，患兒有畏光、眨眼者應仔細檢查眼部。年長兒應注意面板的改變。早期及非典型的病例，眼部的變化較輕，特別在嬰幼兒期容易忽略。對可疑病例可做下列檢查有助於診斷：
1、用小棉拭子蘸生理鹽水，自結膜面上輕輕刮下少許物質，在顯微鏡下可見到角質上皮細胞;
2、血清維生素A測定是最可靠的指標，正常小兒血清維生素A值一般為300～500g/L，患缺乏症時則減少至200g/L甚至100g/L以下;
3、取新鮮中段尿約10mg加1％龍膽紫溶液數滴，搖勻，做上皮細胞計數。每立方毫米的正常尿至多含皮皮細胞3枚;超過3枚以上者除泌尿系炎症外，可表示維生素A缺乏。用高倍顯微鏡檢查尿沉澱，更可測知上皮細胞角質變性的程度。
若食物中維生素A缺乏或有吸收障礙，可在數星期內出現症狀。小嬰兒患先天性膽道梗阻、嬰兒肝炎綜合徵，若併發肺炎則可在短時間內出現眼乾燥症，應及早注意。
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