一天中服用葉酸片的最佳時間一般為早飯後1-2小時左右，有利於藥物的吸收。
葉酸為一種水溶性的維生素，通常空腹時服用效果最好。但由於葉酸對胃腸道有一定的刺激性，空腹服用可能會出現噁心、嘔吐等症狀，因此建議最好在飯後1-2個小時服用；其次，早上胃腸功能活躍，有利於葉酸的吸收，一般不建議晚上服用。葉酸片本身是一種維生素，如果正常飲食營養均衡，一般人無需特意補充，但如果想要備孕，建議可以在懷孕前的三個月開始服用葉酸，直到孕後最初3個月內。
服用葉酸時，應注意慎用其他藥物，平時保證飲食營養均衡，避免偏食、挑食。如果為備孕期間，需注意規律作息，避免勞累、熬夜，保持愉快的心情。
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